Liraglutidpulver CAS 204656-20-2

Liraglutidpulver, Molekulare Formel C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, Molekulargewicht 1209,40. Es ist ein künstlich synthetisiertes acyliertes menschliches Glucagon wie Peptid-1 (GLP-1) -Analogon mit über 97% Sequenzähnlichkeit im Vergleich zu natürlicher GLP-1. Kann in Wasser, Ethanol und Propylenglykol gelöst werden. Die 34. Lysinposition des natürlichen GLP-1-Moleküls wird durch Arginin ersetzt, das nicht nur die Bindungszeit zwischen Acylierungsprodukten und Proteinen bewahrt und verlängert, sondern auch den Nachteil des einfachen Abbaues von GLP signifikant überwindet. Unter normalen Speicherbedingungen weist es eine gute Stabilität auf, und seine wässrige Lösung kann mindestens 2 Jahre lang physikalische und chemische Stabilität aufrechterhalten.

Genetische Toxizität: die Ergebnisse des Ames -Tests fürLiraglutidpulverDer chromosomale Aberrationstest für menschliche periphere Blutlymphozyten und der Ratten -Mikronukleus -Test waren alle negativ.

Fortpflanzungstoxizität:

1. männliche Ratten wurden 4 Wochen vor der Paarung und während der Paarung subkutan mit 0,1, 0,25 und 1,0 mg/d Liraglutid injiziert. Bei einer Dosis von 1,0 mg/kg/d wurde die männliche Tierfruchtbarkeit nicht direkt betroffen. Gemäß den Plasma -AUC -Berechnungen betrug die durch diese Dosis erzeugte systemische Exposition ungefähr das 11 -fache der menschlichen Exposition bei der maximal empfohlenen menschlichen Dosis (MRHD). Die subkutane Injektion von 1,0 mg/kg in weibliche Ratten führte zu einem erhöhten frühen embryonalen Tod, sichtbaren Gewichtszunahme und einer verminderten Nahrungsaufnahme.

2. 2 Wochen vor der Paarung bis zum 17. Schwangerschaftstag bei weiblichen Ratten wurden subkutane Injektionen von 0,1, 0,25 und 1,0 mg/kg/d Liraglutid verabreicht. Gemäß den Plasma -AUC -Berechnungen betrug die durch diese drei Dosen erzeugte systemische Exposition ungefähr 0,8, 3 und das 11 -fache der der menschlichen Exposition nach MRHD. In der 1mg/kg/d -Dosisgruppe gab es einen leichten Anstieg der Anzahl früher embryonaler Todesfälle. In allen Dosen wurden fetale Anomalien, Nieren- und Gefäßvariationen, unregelmäßige Ossifikation des Schädels und ein vollständiger Zustand der übermäßigen Ossifikation beobachtet. Bei einer Dosis von 1,0 mg/kg/d wurden eine fleckige Leber und eine leichte Rippenverdrehung beobachtet. Die Inzidenz von fetalen Missbildungen, die den gleichen Zeitraum und die gleiche Kontrolle überschreiten, beträgt: Oropharyngeal -Missbildungen und/oder Stenose bei der Halsöffnung bei einer Dosis von 01 mg/kg/d und Nabelschnurdefehlungen bei Dosen von 0,1 und 0,25 mg/kg/d.

Am 6. bis 18. Schwangerschaftstag wurden Kaninchen in Konzentrationen von 0,01, 0,025 und 0,05 mg/kg/d subkutan mit Liraglutid injiziert. Laut Plasma -AUC -Berechnungen war die systemische Exposition schwangerer Kaninchen niedriger als die des Menschen während der MRHD. Bei allen Dosen nahm das fetale Gewicht ab und die allgemeine Inzidenz schwerer fetaler Anomalien stieg dosisabhängig. At doses of 0.01mg/kg/d (kidney, shoulder and spleen bones),>=0.01mg/kg/d (eyes and forelimbs), 0.025mg/kg/d (brain, tail and vertebrae, large blood vessels and heart, umbilical cord),>=0.025mg/kg/d (sternum), and 0,05 mg/kg/d (Parietalknochen und große Blutgefäße), die Inzidenz von Fehlbildungen überstieg die der zeitgenössischen und historischen Kontrollen. Unregelmäßige Ossifikation und/oder Skelettanomalien finden Sie im Schädel und im Kragen, in den Reber und in den Rippen, im Brustbein, im Becken, in der Kokcyx sowie an Schulter- und Milzknochen; Es gibt auch eine leichte dosisabhängige Skelettvariation sichtbar. Viszerale Anomalien finden sich in Blutgefäßen, Lungen, Leber und Speiseröhre. Alle Behandlungsgruppen zeigten Doppellappen oder Bifurkationen der Gallenblase, aber in der Kontrollgruppe wurde keine ähnliche Situation beobachtet.

4. Während des Zeitraums von Tag 6 der Schwangerschaft bis zur Entwöhnung oder Beendigung der Laktation am 24. Tag wurden weibliche Ratten subkutan mit 0,1, 0,25 und 1,0 mg/kg/d Liraglutid injiziert. Nach Plasma -AUC -Berechnungen betrug die systemische Exposition ungefähr 0,8, 3 und das 11 -fache der menschlichen Exposition während der MRHD. Die Abgabezeit der meisten Tiere in der Behandlungsgruppe war leicht verzögert. Das durchschnittliche Gewicht von Neugeborenen in der Behandlungsgruppe war niedriger als das in der Kontrollgruppe. Weibliche Ratten in der Dosisgruppe von 1,0 mg/kg/d zeigten während der Entbindung Blutverlust und Aufregung. Das durchschnittliche Körpergewicht von F2 -Nachkommen Ratten in der Behandlungsgruppe von der Geburt bis zum 14. Tag nach der Geburt war niedriger als die der Kontrollgruppe, aber die Unterschiede zwischen den Gruppen erreichten keine statistische Signifikanz.

Liraglutidpulverist ein künstlich synthetisiertes acyliertes humanes Glucagon wie Peptid-1 (GLP-1) -Analogon mit einer Sequenzähnlichkeit von über 97% im Vergleich zu natürlicher GLP-1. Die molekulare Struktur von Liraglutid umfasst die folgenden Hauptmerkmale: Die 34. Lysinposition des natürlichen GLP-1-Moleküls wird durch Arginin ersetzt, der nicht nur die Bindungszeit zwischen Acylierungsprodukten und Proteinen bewahrt und verlängert, sondern auch den Nachteil von GLPs leichten Begründung überwacht; Eine zusätzliche Fettsäure-Seitenkette wurde dem 26. Lysin zugesetzt, was dazu beiträgt, die Halbwertszeit von Acylierungsprodukten in vivo zu verlängern. Diese einzigartigen molekularen Veränderungen haben dazu geführt, dass Delilaglutid hervorragende Auswirkungen auf die klinische Behandlung zeigen, insbesondere bei Diabetes und Gewichtsverlust.

Die chemischen Methoden zur Synthese von Liraglutid enthalten hauptsächlich die folgenden Schritte:

1. Fragmentsynthese

Teilen Sie zunächst das gesamte Liraglutid in mehrere Segmente, die im Allgemeinen in fünf Segmente unterteilt werden können: 1. bis 4. Aminosäuren, 5. bis 10. Aminosäuren, 11. bis 16. Aminosäuren, 17. bis 24. Aminosäuren und 25. bis 31. Aminosäuren. Jedes Fragment wird getrennt synthetisiert, was die Schwierigkeit und die Kosten der Peptidsynthese verringern und die Syntheseeffizienz verbessern kann.

Für die Synthese jedes Fragments werden im Allgemeinen eine Festphasensynthese oder die Flüssigphasensyntheseverfahren verwendet. Bei der Festphasensynthesemethode werden die Carboxylgruppen von Aminosäuren an das Harz angeschlossen, dann nacheinander die Aminosäuren hinzufügen und schließlich die Peptide aus dem Harz abschneiden. Die Flüssigphasensynthesemethode beinhaltet das Auflösen aller Aminosäuren in einem organischen Lösungsmittel und kondensiert sie dann in Sequenz, um Peptidfragmente zu bilden.

2. Kupplungsreaktion

Führen Sie eine Kopplungsreaktion auf den 5 Peptidfragmenten durch, die in Schritt 1 synthetisiert wurden, um ein vollständiges Liraglutid zu bilden. Die Kopplungsreaktion kann unter Verwendung chemischer oder biologischer Kopplungsmittel durchgeführt werden, und die spezifische Methode kann gemäß den tatsächlichen Bedürfnissen ausgewählt werden.

Bei der Kupplungsreaktion ist es notwendig, die Aminogruppe jedes Fragments mit der Carboxylgruppe des nächsten Fragments zu verbinden. Um dies zu erreichen, ist es normalerweise erforderlich, Kondensationsmittel wie DIC oder BOP zu verwenden. Diese Kondensationsmittel können die Reaktion zwischen Amino- und Carboxylgruppen fördern und Peptidbindungen bilden. Bei der Kopplungsreaktion sollte auch die Kontrolle der Reaktionsbedingungen wie Temperatur, pH -Wert und Reaktionszeit beachtet werden, um den glatten Fortschritt der Reaktion sicherzustellen.

3. Reinigung und Identifizierung

Das synthetisierte Liraglutid muss gereinigt und identifiziert werden, um die Reinheit und Qualität des Produkts zu gewährleisten. Die Reinigung wird normalerweise unter Verwendung von Methoden wie Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) oder Elektrophorese durchgeführt, gefolgt von Identifikation unter Verwendung von Massenspektrometrie, Kernmagnetresonanz und anderen Methoden. Mit diesen Mitteln kann sichergestellt werden, dass das Molekulargewicht und die Abfolge des synthetisierten Produkts mit den Erwartungen übereinstimmen und keine Unreinheiten oder Nebenproduktreste vorhanden sind.

4. Andere Modifikationen

Zusätzlich zu den oben genannten Schritten sind manchmal andere Modifikationen erforderlich, z. B. das Hinzufügen oder Entfernen von Schutzgruppen. Diese Schritte sind auch wesentlich, da sie die aktiven Gruppen in Peptiden vor zerstört oder Nebenreaktionen schützen können, wodurch die Qualität und Ertrag von synthetisierten Verbesserungen verbessert werdenLiraglutidpulver.

Die oben genannten sind die wichtigsten chemischen Methoden zur Synthese von Liraglutid, aber natürlich müssen einige Details und Techniken im praktischen Betrieb festgestellt werden. Beispielsweise kann die Auswahl des geeigneten Lösungsmittelsystems, die Steuerung von Temperatur und den pH -Wert und die Verwendung geeigneter Katalysatoren die Syntheseeffizienz und die Produktqualität beeinflussen. Daher müssen im praktischen Betrieb Anpassungen und Optimierungen gemäß bestimmten Umständen vorgenommen werden.

Liraglutid (ein langwirksamer GLP-1-Rezeptoragonist) spielt eine signifikante Rolle bei der Behandlung von Diabetes. Um die Qualitätssteuerbarkeit zu gewährleisten, ist es erforderlich, wissenschaftliche und strenge analytische Methoden festzulegen und eine systematische Validierung durchzuführen, um die Zuverlässigkeit dieser Methoden sicherzustellen. Die folgende Analyse erfolgt aus drei Aspekten: Validierungselemente, Validierungsmethoden und wichtige Steuerungspunkte.

Kernüberprüfungsgegenstände und technische Anforderungen

Spezifität

Ziel: zu beweisen, dass die Methode Liraglutid von Verunreinigungen, Abbauprodukten und Hilfsmitteln unterscheiden kann.

Implementierungsstrategie:

Chromatographie: Verwenden Sie HPLC-UV oder UPLC-MS. Durch erzwungene Abbau-Tests (wie hohe Temperatur, Lichtbelastung, Säure-Base-Hydrolyse) erzeugen Abbauprodukte und überprüfen Sie den Trennungsgrad des Hauptpeaks und des Verunreinigungsspitzenes (größer oder gleich 1,5). In der Untersuchung des ApoE-/- Mausmodells müssen beispielsweise nach Liraglutid oxidiert werden, die Abbauprodukte (wie Ameisensäureduddukte) durch chromatographische Analyse bestätigt werden, um den Trennungseffekt der Abbauprodukte vom Hauptpeak sicherzustellen.

Spektroskopie: Verwenden Sie einen PDA -Detektor, um die UV -Spektren der Hauptpeak und Verunreinigungen zu vergleichen und die Reinheit der Peaks zu bestätigen.

Blindkontrolle: Überprüfen Sie das Fehlen falscher positiver Signale unter Verwendung von Proben ohne Liraglutid (wie Hilfslösungen).

 

Genauigkeit

Ziel: Stellen Sie sicher, dass die gemessenen Ergebnisse nahe am wahren Wert liegen und die Wiederherstellungsrate innerhalb von 98% - 102% gesteuert wird.

Implementierungsstrategie:

Standard -Addition -Wiederherstellungstest: Fügen Sie einer Probe eine bekannte Menge an Referenzsubstanz mit dem bekannten Liraglutidgehalt hinzu und messen Sie die Wiederherstellungsrate. In der Analyse der Formulierung beispielsweise 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml und 1,5 mg/ml Liraglutid zur leeren Hilfslösung hinzufügen, wiederholen Sie jede Konzentration dreimal und berechnen Sie die durchschnittliche Wiederherstellungsrate.

Vergleichsmethode: Vergleichen Sie mit klassischen Methoden (z. B. Titration) oder verifizierten Methoden (z. B. Pharmakopoeia -Methoden), und die Ergebnisabweichung sollte weniger als oder gleich 2%betragen.

 

Präzision

Ziel: Bewerten Sie den Grad der Nähe der wiederholten Messergebnisse, wobei RSD weniger als oder gleich 2%ist.

Implementierungsstrategie:

Wiederholbarkeit: Führen Sie 6 aufeinanderfolgende Messungen derselben Probe durch denselben Analysten, das gleiche Instrument und dieselbe Probenstapel durch und berechnen Sie die RSD.

Intermediate -Genauigkeit: Berechnen Sie den RSD, indem Sie dieselbe Probenstapel durch verschiedene Analysten, verschiedene Instrumente und verschiedene Daten bestimmen. Beispielsweise sollte bei der Bestimmung des Liraglutidgehalts die Wiederholbarkeits -RSD unter oder gleich 1,5%und die mittlere Präzisions -RSD unter oder gleich 2,0%betragen.

Reproduzierbarkeit: Kollaborative Überprüfung durch mehrere Labors (wie Pharmakopoeia -Standardmethoden), RSD sollte den Leitprinzipien einhalten.

 

Erkennungsgrenze und Quantifizierungsgrenze

Ziel: Bestimmen Sie die minimale Konzentration, die das Verfahren Liraglutid erkennen und quantifizieren kann.

Implementierungsstrategie:

Signal-Rausch-Verhältnismethode: Bestimmen Sie LOD mit einem 3: 1-Signal-Rausch-Verhältnis und bestimmen Sie LOQ mit einem Signal-Rausch-Verhältnis von 10: 1. Beispielsweise kann im HPLC-UV-Verfahren die LOD von Liraglutid nur 0,01 ug/ml betragen und der LOQ 0,05 ug/ml beträgt.

Standardkurvenmethode: Berechnen Sie LOD und LOQ unter Verwendung der Antwortsignale von Standard-Substanzen mit niedriger Konzentration (z. B. 0,1 ug/ml - 1 ug/ml).

 

Linearität

Ziel: zu beweisen, dass das Antwortsignal proportional zur Konzentration ist, wobei R² größer oder gleich 0,999 ist.

Implementierungsstrategie:

Gradientenkonzentrationstest: Erstellen Sie 5-7 Konzentrationsgradienten (z. B. 0,1 mg/ml - 2.0 mg/ml) von Standardlösungen, messen Sie den Peakbereich oder den Antwortwert und zeichnen Sie die Standardkurve.

Restanalyse: Überprüfen Sie, ob die Residuen zufällig verteilt sind und es keine systematische Abweichung gibt.

 

Reichweite

Ziel: Bestimmen Sie den anwendbaren Konzentrationsbereich der Methode, normalerweise 120% des LOQ an die Obergrenze der Linearität.

Implementierungsstrategie:

Inhaltsbestimmung: Der Bereich ist auf 80% - 120% der markierten Menge festgelegt. Beispielsweise sollte der Inhaltsbestimmungsbereich der Liraglutidformulierung 0,4 mg/ml - 1.2 mg/ml betragen. Verunreinigungskontrolle: Setzen Sie gemäß der ICH Q3D -Richtlinie den Grenzbereich von Verunreinigungen (z. B. Einzelverunreinigungen von weniger als 0,5%, Gesamtverunreinigung von weniger als oder gleich 2,0%).

Validierungsdokumente und Datenverwaltung

01

Validierungsplan und Bericht

Definieren Sie klar die Validierungselemente, Methoden, Akzeptanzstandards und abnormale Handhabungsverfahren. Wenn die Präzisions -RSD beispielsweise die Grenze überschreitet, müssen Instrumentenfehler oder Betriebsfehler untersucht werden.

Notieren Sie die ursprünglichen Daten (z. B. Chromatogramme, Standardkurven, Wiederherstellungsrate -Berechnungstabellen), um die Rückverfolgbarkeit sicherzustellen.

02

Entwicklung der Stabilitätsindikationsmethode

Bei obligatorischen Abbautests sollte es Oxidation, Lichtexposition, Hydrolyse usw. abdecken, um die tatsächlichen Speicherbedingungen zu simulieren. Beispielsweise sollte Liraglutid für 48 Stunden bei 60 Grad platziert werden. Die Verschlechterungsrate sollte größer oder gleich 10% sein, um die Fähigkeit der Methode zur Erkennung von Abbauprodukten zu überprüfen.

03

Vorschriftenregulierung

Folgen Sie Ich Q2 (R2), USP<1225>und chinesische GMP -Richtlinien, um sicherzustellen, dass die Validierungselemente Kernindikatoren wie Spezifität und Genauigkeit abdecken.

Für die Analyse von Elementarverunreinheiten sollte sie ICH Q3D und USP entsprechen<233>Anforderungen, steuern die Grenzen von 1-Klasse-Elementen wie AS, CD und PB.

Beliebte label: Liraglutide Pulver CAS 204656-20-2, Lieferanten, Hersteller, Fabrik, Großhandel, Kaufen, Preis, Volumen, zum Verkauf